Manuel de travaux practiques de genetique

Description

Îndrumătorul asigură studenţilor un excelent instrument de studiu, precum şi de dobândire a unor complexe abilităţi practice. În capitolele corespunzătoare temelor abordate la lucrările practice, frumuseţea geneticii este dezvăluită treptat, informaţia fiind prezentată într-un mod care trezeşte curiozitatea celui care o studiază. Autoarea realizează o sistematizare clară şi uşor de parcurs a întregii tematici abordate, indiferent că este vorba de noţiuni elementare sau de elemente complexe, caracteristice bilogiei moleculare.

 

Content

 Preface

 1 CONCEPTS DE BASE

- Le plan de travail

- Objectif

- Règles de protection du travail

- Organisation du laboratoire

- Importance de l'organisation du matériel génétique (au niveaux moleculaire et cellulaire)

 

2 MÉTHODES D'ANALYSE MOLÉCULAIRE DU MATÉRIEL GÉNÉTIQUE. LE IER PART

- Le plan de travail

- Objectif

- Les analyses génétiques - définition, classification, exemples

- Les étapes de l'analyse moléculaire du matériel génétique

- Extraction d'ADN.

- Technique de travail pour l'extraction d'ADN à partir de sang total

- Technique de travail pour l'extraction d'ADN à partir d'échantillons solides (écouvillons oraux)

- Amplification de l'ADN par réaction de polymerisation en chaîne (PCR)

-  Fragments d'ADN séparés par électrophorèse

- Techniques d'évaluation de l'expression génique

- Méthodes utilisées pour étudier les fragments d'ADN

- Hybridation d'acide nucléique

- La technique de transfert de type Southern blot et transfert de type Northern blot

- Marqueurs d'ADN dans le génome: SNP, RFLP, RAPD

- Microarray/ Biopuce d’ADN

- L’importance pratique des techniques décrites

 

3 MÉTHODES D'ANALYSE MOLÉCULAIRE DU MATÉRIEL GÉNÉTIQUE. LE IIéme PART

- Le plan de travail

- Objectif

- Modifications épigénétiques du matériel génétique

- Méthodes d'analyse de la méthylation de l'ADN. La technique BiSeq de l’ADN(Séquençage bisulfite)

- Techniques utilisées en ingénierie génétique

- Technique d'ADN recombinant

- Obtention de cellules souches pluripotentes induites (CSPi)

- CRISPR/Cas9 (Clustered Regulatory Interspaced Short Palindromic Repeats) technologie

- L’importance pratique des techniques décrites

 

4 MÉTHODES D'ÉTUDE DES CHROMOSOMES PENDANT LA MITOSE

- Le plan de travail

- Objectif

- Révision de la division mitotique

- Morphologie chromosomique

- Etapes de réalisation du frottis cytogénétique

- Méthodes d'étude des chromosomes chez les mammifères

- Méthodes d'obtention de cellules en métaphase dans des cultures cellulaires

- Culture cellulaire à partir de lymphocytes de sang périphérique

- Culture cellulaire à partir de lymphocytes de sang périphérique isolés par centrifugation en gradient avec Ficoll

- Mise en évidence des chromosomes dans les tissus parenchymateux. Technique de Meylon

- Mise en évidence des chromosomes dans la moelle osseuse

- Technique de travail après Tjio et Whang, procédure de séchage

- Autres méthodes d'étude des chromosomes

 

5 MÉTHODES D'ÉTUDE DES CHROMOSOMES AU COURS DE LA MÉIOSE

- Le plan de travail

- Objectif

- Révision de la division méiotique

- Méiose I

- Méiose II

- Importance de la méiose

- Différences entre la division mitotique et la division méiotique

- Méthodes d'étude des chromosomes chez les mammifères

- Technique de travail après Welshons

- Technique de travail après Evans et colab

 

6 MÉTHODES D'ÉTUDE DES BANDES CHROMOSOMIQUES....

- Le plan de travail

- Objectif

- Détails sur les bandes de chromosomes

- Importance pratique de l’étude des bandes

- La bande G

- Obtenir des bandes G par dégradation enzymatique des histones

- Obtenir des bandes G par dégradation avec l’urée

- La bande C

- Coloration des régions organisatrices nucléolaires (NOR)

- La bande R

- La bande Q

- La bande T

 

7 LES ETAPES POUR FAIRE UN CARYOTYPE. PARTICULARITÉ DU CARYOTYPE CHEZ LES MAMMIFÉRES ET OISEAUX

- Le plan de travail-

- Objectif

- Identification des chromosomes et réalisation du caryotype

- La méthode FISH (Fluorescence in situ hybridization)

- Particularités du caryotype animal

- Caryotype chez les bovins (Bos taurus)

- Caryotype chez le mouton (Ovis aries)

- Caryotype chez la chèvre (Capra hircus)

- Caryotype chez le porc (Sus scrofa)

- Caryotype chez le chat (Felis catus)

- Caryotype chez le cheval (Equus caballus)

- Caryotype chez le chien (Canis familiaris)

- Caryotype chez le lapin (Oryctolagus cuniculus)

- Caryotype chez le vison (Mustela vison)

- Caryotype chez le ragondin/coypu (Myocastor coypus)

- Caryotype chez la souri (Mus musculus)

- Caryotype chez le rat (Rattus norvegicus)

- Caryotype chez le porc de guinée (Cavia porcellus)

- Caryotype chez les oiseaux

 

8 MÉTHODES D'ESSAI DU POTENTIEL CLASTOGÈNE

DE CERTAINS AGENTS CHIMIQUES ET PHYSIQUES

- Le plan de travail

- Objectif

- Tests de mutagenèse chez les mammifères. Caractérisation générale

- Test de culture cellulaire

- Test létal dominant (LD-test)

- Test d'échange de chromatides sœurs (SCE)

- Test du micronoyau

- Caractérisation du micronoyau

- Les avantages du test du micronoyau

- Technique de travail

 

9 TRANSFORMATION MALIGNE

Le plan de travail

Objectif

- Considérations générales sur la transformation maligne

- Changements dans la performance de la division

- Réarrangement chromosomique structural

- Réarrangements structurels non spécifiques

- Réarrangements structurels spécifiques

- Les chromosomes dans certaines maladies oncogènes chez les animaux

 

10 MÉTHODES D'ÉTUDE DES HÉTÉROSOMES DANS

LES NOYAUX PENDANT L'INTERPHASE

(DIAGNOSTIC CYTOGÉNÉTIQUE DU SEXE)

Le plan de travail

Objectif

- La chromatine sexuelle

- La position de la chromatine sexuelle dans le noyau

- La fréquence de la chromatine sexuelle

- Forme de la chromatine sexuelle

- La taille de la chromatine sexuelle

- Corrélation entre la fréquence de la chromatine sexuelle et les hétérosomes X

- L’importance de la chromatine X

- Méthodes d'étude de la chromatine sexuelle

- La chromatine Y

- La position et la forme de la chromatine Y dans le noyau

- Fréquence de la chromatine Y

- Importance de la chromatine Y

- Méthodes d'étude de la chromatine Y

 

11 DÉTERMINISME GÉNÉTIQUE, IDENTIFICATION

ET UTILITÉ PRATIQUE DES GROUPES SANGUINS,

DE LA TRANSFERRINE SÉRIQUE ET DE L'HÉMOGLOBINE

- Le plan de travail

- Objectif

- Groupes sanguins chez certaines espèces animales

- Technique de détermination des facteurs antigéniques

- Importance pratique des groupes sanguins

- L'hémoglobine chez les espèces animales

- Technique d'identification de l'hémoglobine

- Importance pratique de l'hémoglobine

- La transferrine sérique chez les espèces animales

- Technique pour l'identification de la transferrine

- L’importance pratique de la transferrine sérique

 

12 L’ENQUÊTE MÉDICALE EN CAS DE MALADIES

HÉRÉDITAIRES. ANALYSE GÉNÉALOGIQUE (PEDIGREE)

- Le plan de travail

- Objectif

- La  maladie héréditaire. La maladie génétique

- Concepts et définitions

- Analyse généalogique (Pedigree)

- Types de pedigrees

- Appréciation d’un individu  après ses collatéraux

 

13 CRITÈRES DE DIAGNOSTIC POUR LA TRANSMISSION DES MALADIES GÉNÉTIQUES

- Le plan de travail

- Objectif

- Informations générales

- Critères de diagnostiques de la transmission autosomique dominante

- Critères de diagnostiques de la transmission autosomique récessive

- Critères de diagnostiques de la transmission liée au sexe

- Critères de diagnostiques de la transmission autosomique polygénique

 

Bibliographie.